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试管中精液的优化处理

    发布时间:2023-08-16   
  1、为什么需要优化处理?
  研究表明,人类精子的畸形率高于其他亲源物种,即使正常可育精子也包含数百万不活动精子和一定比例的畸形精子。不活动精子、畸形精子非但于受精无益,还会污染培养系统,影响体外受精成功率。

  体外受精要求精液精子形态正常,运动能力尤其是向前运动能力强,并达到一定密度。由于精浆中含有抑制精子获能和受精的物质,因此在体外受精前,必须处理精液,去除精浆,去除细菌及可能存在的炎症细胞、抗精子抗体等,分离并富集正常活动精子,提高精子活动率。
  2、有哪些方法?
  实验室常使用密度梯度离心法、上游法和直接离心法三种方式分离正常的精子。
  上游法是将精液加在上游试剂上方共同孵育,使活力好的精子游到上层培养液中。该方法可回收质量较高的精子,优点是不良反应少,可获得更低DNA碎片率的精子;缺点是回收率相对较低。所以该方法适合活动力好,前向运动精子总数多的精液标本,不适合前向运动精子总数少、粘稠或不液化的精液标本。密度梯度离心法是将精液和两种浓度高低不同的梯度分离液从上到下依次分层加入,由于正常精子与畸形精子、不活动精子及精液中其他细胞成分在运动能力、运动轨迹和浮力密度等方面存在差异,在密度梯度溶液中运行的能力也有差异,经离心后得到富集。该方法适用于质量较差、前向运动精子总数较少的精液标本。直接离心法是指将精液与培养液混合后直接离心,将沉淀洗涤后定容于培养液。该方法不能很好的去除精液中的杂质,故适用于精子数少极其珍贵的标本,如睾丸穿刺取精和附睾穿刺取精,一些冷液,逆行射精等。

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